拟南芥pipe突变体的二次诱变及3432pipe突变体的研究

Remutagenesis of Arabidopsis Pipe Mutant and the Study of One Mutant 3432 Pipe

作者: 专业:细胞生物学 导师:侯岁稳 年度:2012 学位:硕士  院校: 聊城大学

Keywords

        本实验室应用EMS(甲基磺酸乙酯)化学诱变处理拟南芥后筛到pipe突变体。pipe突变体植株矮化、缺失顶端优势;部分果荚出现弯曲生长;叶片形状明显狭小且具不规则卷曲。推测PIPE编码一种蛋白磷酸酶,我们实验室已经发现PIPE参与GA(赤霉素)信号转导途径。本论文以pipe突变体为材料进行二次EMS诱变处理,建立了包含有plpe突变基因的双或多突变体库。该库共包含了975个株系,根据株高、果荚是否发生弯曲、莲座叶是否卷曲和叶表皮细胞形态这四种表型进行筛选,最终得到72个完全或部分回复pipe突变体表型的株系和10个加剧pipe突变体表型的株系。一些完全回复株系还具有其他有趣的表型,例如7151、7631等株系的花结构出现缺陷。该二次诱变库对PIPE基因功能的进一步阐述提供了丰富的材料。从库中选出3432 pipe株系进行研究,其表型接近野生型,完全回复了pipe突变体的表型。3432 pipe水分散失率高,不能耐受干旱胁迫,萌发和生长对ABA超敏感,气孔行为却对ABA不敏感。通过施加外源PAC和GA3观察出3432 pipe对PAC和GA3的反应接近于pipe突变体水平;检测出3432 pipe中GA合成关键基因的mRNA表达也接近于pipe突变体水平;运用RGA和GAI的抗体检测出3432 pipe中RGA和GAI的蛋白含量接近于pipe突变体中的蛋白量。已经采用图位克隆的方法把3432 pipe的新突变位点定位到了550 Kb的区间。
    
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